幹細胞療法は、再生医療、免疫療法、および疾患モデルの建設の分野で大きな可能性を示しています。しかし、その臨床応用変換は多くの課題に直面しており、重要なリンクの1つは幹細胞の凍結保存と解凍です。凍結保存溶液の性能は、幹細胞の生存率、機能的安定性、および治療の安全性に直接影響します。したがって、血清 - フリー、DMSO-フリーである凍結保存ソリューションを選択することが重要です。
1.臨床 - グレードの凍結保存ソリューションのコア要件は何ですか？
幹細胞療法が臨床段階に入るとき、それは厳格な品質基準を満たさなければなりません。凍結保存ソリューションの選択は、次のコア要件を満たす必要があります。
（1）高い安全性
①well-定義されたコンポーネント、GMP標準に沿った
化学的に定義された式を選択し、動物を避ける - 派生コンポーネントを避けます。生産がGMP規制に準拠し、完全な品質管理文書があることを確認してください。
②血清 - 無料の
従来の凍結保存ソリューションは胎児のウシ血清に依存することがよくありますが、血清には次の問題があります
。
潜在的な病原体（ウイルスやマイコプラズマの汚染など）のリスク。
免疫原性のリスク。これは、レシピエントの副作用を引き起こす可能性があります。
したがって、臨床 - グレードの凍結保存ソリューションは、血清成分を完全に回避し、ウェル - 定義された化学成分を持つフォーミュラを採用する必要があります。
③DMSO-無料
ジメチルスルホキシド（DMSO）は、従来の凍結保存溶液の主要な凍結防止剤ですが、明らかな欠点があります：
細胞毒性：高濃度（通常10％）は細胞膜とオルガネラを損傷する可能性があります。
患者の副作用：注入後、吐き気、アレルギー、さらには心血管イベントを引き起こす可能性があります。
規制制限：一部の国（日本など）は、DMSOの臨床適用を制限しています。
したがって、臨床 - グレードの凍結保存ソリューションは、少なくともDMSOと同じくらい効果的であるが安全な凍結防止剤を選択する必要があります。優れた凍結保存効果があるだけでなく、十分に安全であるべきです。
（2）高い凍結保存性能：高密度の凍結保存と高い解凍生存率
高い密度凍結保存：臨床 - グレード幹細胞は通常、高密度凍結保存を必要とします。凍結保存ソリューションは、細胞の生存率を低い体積で維持する必要があります。保管スペースの保存と使用される凍結保存ソリューションの量、および各クライチューブの細胞の数が臨床的使用に便利であるかどうかを検討する必要があります。
解凍生存率が高い：解凍後、細胞は元の増殖、分化、および治療機能を維持する必要があります。
長期の安定性：液体窒素の長期貯蔵後も効率的な解凍を維持できます。
2。さまざまな種類の凍結保存ソリューションに適したシナリオは何ですか？
| 凍結保存ソリューションの種類 | コアの利点 | 最適なアプリケーションシナリオ |
| 従来の血清 - 凍結保存ソリューションを含む | 低コスト、単純な準備 | 基本的な実験室研究 |
| 血清 - 自由凍結保存ソリューション | まあ - 定義されたコンポーネント、安全で標準化されています | 前 - 臨床研究 /早期臨床試験 |
| GMP-グレードガラス化細胞凍結保存ソリューション | DMSOの毒性、高い安全性、高い密度凍結保存をサポートしていない | 包括的な臨床アプリケーション |
2。従来の凍結保存ソリューションと比較して、Yo ConのGMP-グレードのガラス化細胞凍結保存ソリューションの利点は何ですか？
従来の凍結保存ソリューションのパフォーマンスと比較して、YoconのGMP -Grade Vitrification Cell Cryopreservationソリューションには次の利点があります。
| パフォーマンスインジケーター | GMP-グレードガラス化細胞凍結保存ソリューション | 従来の凍結保存ソリューション |
| 主なコンポーネント | すべてのコンポーネントは適切です - 定義された、血清 - 無料、タンパク質 - 無料、DMSO-無料 | 通常、血清、複雑なコンポーネントが含まれています |
| DMSO濃度 | DMSO-無料 | 通常、高（10％）、非常に有毒です |
| 細胞生存率 | > 95％ | 70-85％ |
| 関数のメンテナンス | MSCの分化、パラクリン、および免疫調節機能は無傷です | MSCの機能は部分的に損なわれる可能性があります |
| 臨床応用 | 解凍後に使用できます | 多くの場合、DMSOを除去するために洗浄が必要です |
| 安全性 | 非毒性、副作用のリスクはありません | DMSOは副作用を引き起こす可能性があります |
| 利便性 | プログラムされた冷却は必要ありません。 -80°Cに直接配置し、12時間後に長期凍結保存のために液体窒素に直接配置できます。 | プログラムされた冷却が必要です |
| 輸送と保管 | タンパク質 - 遊離、室温で輸送して保存することができます | 低い温度貯蔵が必要です |
3. YoconのGMP-グレードのガラス化細胞凍結保存ソリューションの凍結保存と解凍効果は何ですか？
（1）セル解凍ステータス
 |  |
| p5 | p6 |
8000セル/cm²で継続すると、GMP-グレードのガラス化細胞凍結保存溶液を使用して解凍した細胞は、72時間以内に90％の合流に達する可能性があります。細胞はよく接着し、均一な成長方向を持ち、形状がふっくらしています。
（2）解凍速度と実行可能性の検証
YoconのGMPグレードグレードのガラス化細胞凍結保存ソリューションの細胞解凍能力は、ほぼ100％で安定して維持できます。細胞解凍速度は、DMSO凍結保存ソリューションよりもわずかに高く、インポートされた完成した凍結保存ソリューションのセルよりもはるかに高くなっています。
（3）アポトーシス率と生存率の検証
4つの同等の製品の中で、YoconのGMPグレードのガラス化細胞凍結保存ソリューションは、細胞のアポトーシスの低減と細胞生存率の維持に最適であり、アポトーシス率が最も低くなります。 DMSO、ブランドP、ブランドZのパフォーマンスは比較的近いが、Yoconバイオテクノロジーよりわずかに劣っている。
（4）増幅倍の比較
DMSO凍結保存ソリューションとインポートされた完成した凍結保存ソリューションと比較すると、YoconのGMP-グレードのガラス化細胞凍結保存ソリューションの細胞解凍増幅倍にはほとんど違いはありません。
