研究開発の背景
近年、免疫細胞療法の詳細な調査により、γδT細胞が徐々に前面に出ています。非従来のT-細胞サブセットとして、γδT細胞は主要な組織適合性複合体(MHC)を通じて抗原を認識しているため、がん免疫療法に独自の利点があります。多くの研究により、γδT細胞は自家、同種、または異種腫瘍細胞に対して強い殺害能力を持っていることが示されており、その濃度はしばしば患者の臨床予後と密接に関連しています。
ただし、既存のγδT細胞培養法は、高純度と高量エフェクター細胞の臨床要件をほとんど満たすことができません。 γδT細胞のin -vitro拡張の方法は、主にK562フィーダー細胞株に基づくものとビスホスホネートに基づくものの2つのアプローチに分けることができます。その中で、フィーダー細胞株に基づく拡張方法には、潜在的な安全リスクと厳密な品質管理要件がある腫瘍細胞の導入が必要であり、臨床応用に特定の懸念を引き起こします。ビスホスホネートに基づく拡張方法は、しばしば高い膨張倍を達成できず、後期の細胞生存率に影響します。
これに基づいて、Yocon Biotechは、免疫細胞の分野での長年の成功した経験に依存しており、γδT細胞誘導と拡張キットを開発しました。新しくアップグレードされたNK5.0基底培地と組み合わせると、臨床研究のニーズを満たす、純度が高く、高い正の速度で、細胞の連続的な膨張能力を大幅に向上させます。
製品の紹介
γδT細胞誘導と拡張キット
●in vitroで、ヒトの新鮮で凍結保存された末梢血単核細胞(PBMC)をγδT細胞に誘導および拡大するために使用されます。 14〜16日間の培養後、PBMCは85%を超える正の速度で200以上の細胞拡張を達成できます。
●フィーダー層セルのない純粋な因子によって誘導されます。培養方法はシンプルで操作が簡単で、細胞状態は基本的に均一です。細胞カウントを必要とせずに、推奨される手順に従って媒体を補充します。
●新しくアップグレードされたNK5.0基底培地とペアになっているため、細胞の連続膨張能力が大幅に向上します。
製品のパフォーマンス
◆セル状態
◆
サンプル1:25歳の健康な男性からの新鮮な末梢血単核細胞サンプル。 14日間の培養後、合計4×10°細胞を接種し、90.01%の正の速度で90億個の細胞を回収しました。
サンプル2:35〜年の健康な男性からの凍結保存された末梢血単核細胞サンプル。 14日間の培養後、合計4×10μの細胞を接種し、82億セルを90.29%の正速度で回収しました。
サンプル3:27〜年の健康な男性からの凍結保存された末梢血単核細胞サンプル。 14日間の培養後、合計4×10°細胞を接種し、70億個の細胞を83.51%の正の速度で回収しました。
サンプル4:38〜年の健康な男性からの新鮮な末梢血単核細胞サンプル。 14日間の培養後、合計4×10μの細胞を接種し、81億細胞を92.66%の正の速度で回収しました。
サンプル5:27〜年の健康な男性からの新鮮な末梢血単核細胞サンプル。 14日間の培養後、合計6×10μの細胞を接種し、836億個の細胞を89.98%の正の速度で回収しました。
◆細胞毒性テスト
サンプル1:新鮮な末梢血サンプル。培養の14日後、γδT細胞の正の速度は90.97%でした。
腫瘍細胞毒性試験は、K562細胞と20時間インキュベーションすることにより実施されました。 K562 =(接種されたK562細胞の数-20時間インキュベーション後の残りのK562細胞の数) /接種されたK562細胞の数。エフェクターとターゲットの比率が20:1の場合、殺害効率は約56%でした。エフェクターとターゲットの比率が40:1であった場合、殺害効率は約87%であり、その良好な腫瘍 - 殺害能力を示しています。
末梢血から培養されたγδT細胞の細胞毒性試験
サンプル2:新鮮な臍帯血サンプル。培養の14日後、γδT細胞の正の速度は79.44%でした。
腫瘍細胞毒性試験は、K562細胞と20時間インキュベーションすることにより実施されました。エフェクターとターゲットの比率が20:1の場合、殺人率は約64%でした。エフェクターとターゲットの比率が40:1の場合、殺人率は約93%でした。これは、このキットを使用して臍帯血から培養されたγδT細胞も優れた細胞毒性を持っていることを示しています。
臍帯血から培養されたγδT細胞の細胞毒性試験